品 名:Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF
英文名:Strep-Tactin2 NUPharose Fast Flow, Strep-Tactin2 NUPharose FF
目录号:NRPB61L、NRPB61S(预装柱)
规 格:10 mL, 20 mL,50 mL, 100 mL,500 mL, 1 L,10 L, 1 mL预装柱,5 mL预装柱,特殊规格订制
运 输:2 ~ 25℃,常压、避光
贮 存:20%乙醇,2 ~ 8℃
保质期:3年
相关介绍:
Strep-Tactin 2 NUPharose FF是链霉亲和素的突变体(Strep-Tactin 2配基)和纽龙生物NUPharose琼脂糖凝胶偶联形成的和层析分离介质,用于分离、纯化Strep II或Twin Strep标签蛋白。Strep II标签为8个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),一般不影响融合后蛋白质的结构和功能,常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。Twin Strep标签为两个Strep II串联的标签,相比Strep II标签,Twin Strep标签与Strep-Tactin 2配基的亲和力更高。
本产品的Strep-Tactin 2配基与Strep-Tactin配基相比,对Strep II标签的亲和力进一步提高,与生物素的亲和力大幅削弱。因而本产品能够更牢固的结合Strep II融合蛋白,在融合蛋白表达丰度较低时,相对捕获量更高,载量和得率更高。在洗脱方面,可以使用生物素进行洗脱,比采用昂贵的脱硫生物素洗脱更经济,且使用后可采用10~50 mM NaOH进行再生。本产品对Strep II标签具有高度特异性,一般只需一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。
技术指标:
基质 | 4%交联琼脂糖 |
配基 | Strep-Tactin2 |
配基密度 | ≥5 mg/ml |
平均粒径 | ~ 90 μm |
最大流速 | ≥900 cm/h |
推荐流速 | 60~150 cm/h |
pH稳定性 | 6 ~ 10 |
耐反压 | 0.3 MPa |
载量 | ≥10 mg/ml Strep II标签蛋白 |
使用方法:
1 推荐缓冲液
纯化Strep II标签蛋白
结合缓冲液:100 mM Tris-HCl,150 mM NaCl,1 mM EDTA,pH 8.0;
或20 mM NaH2PO4,280 mM NaCl,6 mM KCl,pH 7.4
洗脱缓冲液:结合缓冲液 + 10~50 mM D-生物素;
再生缓冲液:10~50 mM NaOH
2 样品准备
上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品。并且上柱前应过0.45 μm滤膜或高速离心去除不溶物。
3 样品纯化
3.1 平衡:取适量的Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF装入合适的层析柱中,用蒸馏水清洗5个柱体积去除保存液,再用结合缓冲液平衡5个柱体积,建议流速为100 cm/h。
3.2 上样:将准备好的样品上柱,建议流速为20 ~ 100 cm/h,可根据实际结合情况选择流速,能获得较好的效果。
3.3 再平衡:上样后用结合缓冲液平衡10个柱体积以上,或平衡至基线,洗去杂质,推荐流速为100 cm/h。
3.4 洗脱:用洗脱缓冲液洗10 ~ 20个柱体积,建议流速为100 cm/h,收集的洗脱液应立即调节pH至稳定范围,并根据需要置换缓冲液。
3.5 NaOH再生:洗脱目的蛋白后的柱子用蒸馏水清洗3 ~ 5个柱体积,并用 NaOH再生3 ~ 5个柱体积,再用蒸馏水清洗至中性,用20%乙醇保存柱子,或进行下一次纯化。
导购指南
中文名 | 英文简称 | 货号 | 规格 | 产品描述 |
重力预装柱 | ||||
Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF重力预装柱 | Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF pre-packed column | NRPB61S-Z11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB61S-Z41 | 4*1mL | 4支*1ml | ||
NRPB61S-Z15 | 1*5mL | 1支*5mL | ||
NRPB61S-Z25 | 2*5mL | 2支*5mL | ||
AKTA中压预装柱 | ||||
Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF中压预装柱 | Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF pre-packed column | NRPB61S-Y11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB61S-Y41 | 4*1mL | 4支*1ml | ||
NRPB61S-Y15 | 1*5mL | 1支*5mL | ||
NRPB61S-Y25 | 2*5mL | 2支*5mL | ||
填料 | ||||
Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF | Strep-Tactin2琼脂糖凝胶FF | NRPB61L-10 | 10mL | 1瓶*10ml |
NRPB61L-20 | 20mL | 1瓶*20ml | ||
NRPB61L-100 | 100mL | 1瓶*100ml | ||
NRPB61L-500 | 500ml | 1瓶*500ml | ||
注:纽龙生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积 |